Квантифероновый тест на туберкулёз – диагностический метод выявления инфекции. Он является современной альтернативой пробы Манту (классический тест с применением туберкулина). По рекомендации ВОЗ всё большее число стран переходит на использование этой методики. Он разработан австралийскими специалистами микробиологами и выявляет болезнь при любой её форме, в том числе и латентной. Тест не оказывает негативного влияния на организм и не имеет противопоказаний.
Принцип тест-диагностики на туберкулёз
Квантифероновый тест это анализ на обнаружение туберкулёза, при котором исследуется венозная кровь. Исследование направлено на выявление гамма-интерферона, который вырабатывается только у инфицированных людей. Тест предполагает оценку ответной реакции организма на внедрение возбудителя заболевания (палочка Коха).
С помощью теста определяют гамма-интерферон INF-γ, который высвобождается чувствительными иммунными Т-клетками. Их продукцию стимулируют специфическими протеинами (белками) – CFP-10, ESAT-6, TB7.7. В качестве исследуемого материала берут венозную кровь, в которой определяют содержание гамма-интерферона.
Для диагностики используют метод твёрдофазного ИФА. В комплект для тестирования входят три пробирки – одна для исследования и в качестве контроля.
Венозная кровь собирается в три пробирки:
- Пробирка Nil – контрольно-отрицательный сосуд. В него капают несколько капель гепарина. У здорового человека гамма-интерферон не продуцируется и не определяется.
- Пробирка Mitogen – контрольно-положительный сосуд. При проведении диагностики выделяется интерферон.
- Пробирка Antigen – в сосуд вводятся антигены возбудителя, на которых должна сформироваться ответная иммунная реакция (происходит выработка интерферона).
Первые две пробирки нужны для оценки нормальной физиологической реакции иммунных клеток (лейкоцитов) относительно выработке интерферона. Реакция в пробирке Antigen сопоставляется с результатами в контрольных пробирках.
Аналитическая методика ИФА является максимально точной, так как вмешательство людей в процесс исследования минимальный. Но она требует высокотехнологичного оборудования и соответствующей квалификации лабораторного сотрудника.
Этапы проведения анализа:
- Каждую пробирку (Nil, Antigen, Mitogen) наполняют 1 мл биоматериала. Тщательно перемешивают и помещают в термостат на 16-24 часа при температуре 37 °C.
- Пробирки отправляют в центрифугу на 15 минут.
- Собирают полученную плазму, которая может храниться в холодильнике до месяца.
- Образцы плазмы согласно правилам ИФА вносят в ячейки специального планшета и оставляют в термостате на 2 часа при комнатной температуре.
- Планшет промывают и вносят субстрат. Через 30 минут подсчитывают оптическую плотность.
- Оценка результатов компьютеризирована и проводится автоматически. Ответ распечатывается на принтере.
В современных лабораториях могут предложить альтернативу квантиферонового анализа. Тубинфероновый тест это диагностический комплекс на основе протеинов, которые определяют антигены, и туберкулиновой пробы. Исследование показано в том случае, когда нужно дифференцировать туберкулёз лёгких от генерализованной БЦЖ-инфекции, например, у ВИЧ-инфицированных пациентов.
Показания для назначения теста
Исследование назначают взрослым и детям, независимо от возраста.
Квантифероновый тест с высокой точностью определяет наличие возбудителя в организме. По статистике ВОЗ, туберкулёзная палочка обнаруживается у трети населения земного шара, но в большинстве случаев в латентной фазе. Анализ не подходит для массовой диагностики, а только в индивидуальном порядке, когда необходимо подтвердить или опровергнуть активность патологического процесса, развитие болезни, заразности для окружающих.
Показания для проведения теста:
- выявление установленных контактов с инфицированным человеком (туберкулёз в активной стадии);
- исключение ложноположительной реакции пробы Манту;
- противопоказания у ребёнка к проведению туберкулёзной пробы или Диаскинтеста;
- дифференциальная диагностика при заболеваниях, вызванных микобактериями туберкулёза.
Тест проводят людям, которые входят в группу риска – медицинские работники туберкулёзного диспансера. Цель исследования выявить латентную форму инфицирования. Если результат положительный, такие люди чаще наблюдаются с целью контроля ситуации.
Анализы также проводят иммигрантам, которые претендуют на постоянное место жительства в стране.
Интерпретация результатов теста
Гамма-интерфероновый тест не даёт сведений о том, какая фаза заболевания у человека: скрытая (латентная) или активная. Если результат положительный, необходимо обратиться за консультацией к врачу и пройти комплексное обследование организма.
Показатели уровня гамма-интерферона не взаимосвязаны со степенью заболевания и его формами. По анализам нельзя сделать вывод о переходе скрытой фазы в активную или уровне ответной реакции иммунитета.
Значения интерпретации:
- отрицательный – микобактерии туберкулёза отсутствуют;
- положительный – наличие возбудителя инфекции в организме;
- сомнительный – повышенная индивидуальная чувствительность к ТВ-антигену.
Отрицательный результат не исключает заражение инфекцией в будущем. В некоторых случаях в виде исключения, могут получить ложноотрицательные значения. Это происходит при таких обстоятельствах:
- инфицирование на ранних стадиях;
- детский возраст до 5 лет;
- нарушение процедуры выполнения лабораторного исследования;
- иммунодефицитные состояния в анамнезе (ВИЧ, СПИД).
Положительный результат говорит об инфицировании палочкой Коха или нетуберкулёзными микобактериями.
Сомнительный анализ бывает при индивидуальных особенностях иммунной системы и при нарушении алгоритма проведения анализа в лаборатории. В этом случае врач решает самостоятельно, нужен ли повторный тест или назначить комплексное обследование.
При расшифровке результатов нужно учитывать показатели других исследований, клинический анамнез и эпидемиологическую обстановку в регионе.
Анализ делается от 3 до 10 суток. Венозную кровь берут натощак, лучше с утра после ночного сна, так как за 8 часов до проведения теста нельзя принимать пищу.
Возможные противопоказания?
Противопоказаний для проведения диагностики на наличие в крови антител не существует. Квантифероновый тест абсолютно безопасен, так как он предусматривает только забор крови. Поэтому тест показан людям, которым нельзя проводить пробу Манту или Диаскинтест.
Исследования являются альтернативой при индивидуальной непереносимости туберкулина – очищенный туберкулёзный аллерген, разведённый в соответствии со стандартами.
Тест можно проводить в период обострения хронических соматических заболеваний.
Наличие аллергии или кожных болезней, не являются препятствием для точной диагностики в сравнении с другими методиками.
Анализ делают маленьким детям в период карантина в детских дошкольных учреждениях.
Преимущества диагностической методики
Главное преимущество квантиферонового теста – это отсутствие абсолютных и относительных противопоказаний.
Если тест проводить одновременно с вакцинацией БЦЖ, то исключается вероятность ложноположительных результатов.
Процедура абсолютно безопасна, так как не предусматривает введение в организм никаких микробиологических жидкостей и веществ. Исходя из этого, исключаются побочные реакции и осложнения, которые случаются при вакцинации.
Расшифровка результатов в автоматическом режиме значительно снижает субъективность, которая часто бывает при оценивании пробы Манту (замер инфильтрата прозрачной линейкой).
Тест имеет высокую чувствительность – вероятность точной идентификации болезни с помощью данного исследования. Она составляет 89%. Этот параметр показывает процент больных пациентов в обследуемой группе людей (популяции).
Специфичность теста достигает 99,1%. Она показывает процент обследуемых здоровых людей, у которых результаты отрицательные. В детском возрасте тест показывает высокую специфичность, но чувствительность, наоборот, низкая. При диагностике туберкулёза у ребёнка в каждом шестом случае наличие инфекции в организме не обнаруживается, хотя она есть. С целью предупредить ложноотрицательный результат сначала проводят пробу Манту, а затем по показаниям делают квантифероновый анализ.
Тест показан только в том случае, если у ребёнка сильная реакция на введение туберкулина или вираж Манту. Это когда переход отрицательной реакции на пробу в положительную или если папула увеличивается в диаметре на 6 сантиметров и более.
Удобство теста заключается в том, что достаточно одного посещения для сдачи крови.
С помощью анализа можно диагностировать туберкулёзную патологию за пределами лёгких – наличие инфекционных очагов в почках, позвоночном столбе, тазовых костях, пищеварительном тракте.
Квантифероновый тест более ориентирован на детское население. Это аналог традиционной пробы Манту, но с явными преимуществами, так как не требует введения вакцины внутрикожно. Его назначают при положительной реакции на туберкулин.
Высокоточная информативность теста и его безопасность позволяет определить наличие возбудителя в организме у людей, независимо от состояния их здоровья, возраста. Анализ будет положительным при любой форме и стадии заболевания. К недостаткам теста относится дороговизна диагностики, поэтому анализ не всегда доступен широким массам населения. Квантифероновая диагностика только в редких случаях даёт ложноположительный результат, особенно при наличии в организме нетуберкулёзных микобактерий или высокой индивидуальной чувствительности иммунной системы.
